大鼠腎足突細胞培養試劑盒說明書

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大鼠腎足突細胞培養試劑盒【Rat kidney PrimaCell: Normal Renal Podocytes】
  大鼠腎足突細胞培養試劑盒說明書腎是脊椎動物的一種器官，屬于泌尿系統的一部分，負責過濾血液中的雜質、維持體液和電解質的平衡，后產生尿液經由后續管道排出體外；同時也具備內分泌的功能以調節血壓。在人體中，正常成人具備兩枚腎臟，位于腰部兩側后方。其中，大鼠腎足突細胞傳5代以上仍可以保持原代細胞的分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。 雖然腎足突組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的腎足突組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的腎足突組織片能使得腎足突組織中細胞的一些功能特性發生改變，從而將腎足突細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養大鼠腎足突細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的腎足突原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠腎足突細胞培養試劑盒適合于培養大鼠的腎足突細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠腎足突細胞組織解離液(3×ml) （2）大鼠腎足突細胞組織處理緩沖液(00ml) （3）FibrOutTM大鼠腎足突細胞成纖維抑制劑 (ml（500x）) （4）大鼠腎足突細胞組織洗液(5 x 00 ml) （5）大鼠腎足突細胞生長因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠腎足突細胞基礎培養基(5 x 00ml) （7大鼠腎足突組織預備液 ( x 00 ml) （8）大鼠腎足突細胞培養試劑盒使用說明書

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注意事項：
. 接收到大鼠腎足突細胞培養試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。

培養步驟：
大鼠腎足突細胞培養試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

AFP / alpha-fetoprotein 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM    25 Test

CD77 / PRV- / PRV 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

GCSH 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   IHC-P    50 µg

CQBP / HABP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IP    50 µg

SCGN / Secretagogin 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L 抗體, 兔單抗 WB   IF   IP  ICC/IF    50 µg

BCL2 / Bcl-2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µL

CD0 / Neprilysin / MME 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD2 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

ICOS Ligand / B7-H2 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM    25 Test

大鼠腎足突細胞培養試劑盒說明書硫酸鉻鉀分子式：499.4英文名稱：Potassium chromium sulfate：7788-99-0分子量： CrKO8S2.2H2O

,3,5-三異丙分子式：204.35英文名稱：,3,5- three ISO：77-74-8分子量： C5H24

2-溴---4-硝分子式：327.9英文名稱：2- -- -4-：749-4-6分子量： C6H3BrINO2

六羰鉬分子式：264英文名稱：Six carbonyl molybdenum：3939-06-5分子量： C6MoO6

4-氯-7-硝-2,,3-并氧雜惡二唑(NBD-Cl)英文名稱：4-, -7-, -2,,3-,, NBD-Cl, and oxygen, two分子式：99.55分子量： C6H2CLN3O3：099-89-0

(2B油）鄰氯對甲分子式：4.6英文名稱：(2B) ortho chlorine to amino toluene：95-74-9分子量： C7H8ClN； ClC6H3(CH3)NH2

-甲-5-乙氧羰吡唑分子式：英文名稱：- methyl -5- ethyl：97079-26-8分子量： C7H0N2O2

二脲分子式：242.28英文名稱：Two phenyl urea：40-22-7分子量： C3H4N4O； C6H5NHNHCONH

丙酸鉀分子式：2.7英文名稱：Potassium propionate：327-62-8分子量： C3H5KO2

人參皂苷Rb3英文名稱：Ginsenoside Rb3分子式：079.2685分子量：C53H90O22：68406-26-8