人肺癌組織源細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 說明書

人肺癌組織源細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 【Human Cancer PrimacellTM：Lung Cancer Tissues Cells】
  人肺癌組織源細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 說明書肺癌是發(fā)生于肺臟的癌病類疾病，為常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤，絕大多數(shù)肺癌起源于支氣管粘膜上皮，故亦稱支氣管肺癌。肺癌起源于支氣管粘膜上皮，局限于基底膜內(nèi)者稱為原位癌癌腫，可向支氣管腔內(nèi)或/和臨近的肺組織生長(zhǎng)，并可通過淋巴血行或經(jīng)支氣管轉(zhuǎn)移擴(kuò)散。癌瘤生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)移擴(kuò)散的情況，與癌瘤的組織學(xué)類型、分化程度等生物學(xué)特性有一定關(guān)系。臨床上可將肺癌分為鱗形細(xì)胞癌(又稱鱗癌)、未分化癌、腺癌和肺泡細(xì)胞癌。肺癌細(xì)胞呈上皮樣，貼壁生長(zhǎng)，具有無限增殖能力，喪失接觸抑制現(xiàn)象，癌細(xì)胞間粘著性減弱。此外，易于被凝集素凝集，細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)發(fā)生紊亂。 雖然肺癌組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的肺癌組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的肺癌組織片能使得肺癌組織中人肺癌組織源細(xì)胞細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將人肺癌組織源細(xì)胞細(xì)胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的人肺癌組織源細(xì)胞細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的人肺癌組織源細(xì)胞原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。

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注意事項(xiàng)：
. 接收到人肺癌組織源細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 說明書，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

培養(yǎng)步驟：
人肺癌組織源細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 說明書對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

HER2 / ErbB2 / CD340 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 µg

Estrogen Receptor alpha 抗體, 兔單抗 WB    50 µg

ICAM-2 / CD02 抗體, 兔單抗 ELISA   WB    50 µg

TUBB3 / beta III Tubulin 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IP    50 µg

SLC2A4 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC-P   IF  ICC/IF    50 µL

CD27 / TNFRSF7 抗體 (PE), 兔單抗 FCM    25 Test

Interferon alpha 2 / IFNA2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

TNFRSF9 / TROY 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD85 / ILT2 / ILR / LILRB 抗體, 鼠單抗 FCM    50 µg

CD9 抗體, 兔單抗 ELISA   IP    50 µg

人肺癌組織源細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 說明書,2-雙(*硅烷)分子式：222.48英文名稱：,2- bis (three methyl silicone) benzene：75-09-6分子量： C2H22Si2

,4-雙(二甲氯甲硅烷)分子式：263.3英文名稱：,4- bis (two methyl chloride) benzene：078-97-3分子量： C0H6Cl2Si2

高純碳酸鍶分子式：47.63英文名稱：High purity strontium carbonate：633-05-2分子量： SrCO3

萘酮英文名稱：Nalidixic acid分子式：232.24分子量： C2H2N2O3：389-08-2

2-氯-4,6-二甲氧嘧分子式：74.58英文名稱：2- -4,6- two a：3223-25-分子量： C6H7ClN2O2

4-戊氧-4'-聯(lián)(5OCB)分子式：265.35英文名稱：4- pentyloxy -4'- cyano biphenyl (5OCB)：52364-7-3分子量： C8H9NO

甲氧蟲酰分子式：368.47英文名稱：A methyl oxygen：6050-58-4分子量： C22H28N2O3

鈦酸鍶分子式：83.49英文名稱：Strontium titanate：2060-59-2分子量： O3SrTi

2,4-二氯-5-甲嘧分子式：63英文名稱：2,4- two -5-：780-3-0分子量： C5H4Cl2N2

3,4-二吡唑分子式：39.87英文名稱：3,4- two iodine：6645-70-分子量： C3H2I2N2