小鼠尿道上皮細胞培養試劑盒說明書

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小鼠尿道上皮細胞培養試劑盒【Human Bone PrimacellTM：Osteblasts】
     小鼠尿道上皮細胞培養試劑盒說明書尿道是從膀胱通向體外的管道。其中，人尿道上皮細胞傳5代以上仍可以保持原代細胞的分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。 雖然尿道上皮組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的尿道上皮組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的尿道上皮組織片能使得尿道上皮組織中細胞的一些功能特性發生改變，從而將尿道上皮細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養小鼠尿道上皮細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的尿道上皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 小鼠尿道上皮細胞培養試劑盒適合于培養小鼠的尿道上皮細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠尿道上皮細胞組織解離液 (3×ml) （2）小鼠尿道上皮細胞組織處理緩沖液 (00ml) （3）FibrOutTM小鼠尿道上皮細胞成纖維抑制劑(ml（500x）) （4）小鼠尿道上皮組織洗液(5 x 00 ml) （5）小鼠尿道上皮細胞生長因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠尿道上皮細胞基礎培養基(5 x 00ml) （7）小鼠尿道上皮組織預備液 ( x 00 ml) （8）小鼠尿道上皮細胞培養試劑盒使用說明書
培養步驟：
小鼠尿道上皮細胞培養試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

人臍靜脈平滑肌細胞*培養基人腺成纖維細胞*培養基

牛舌菌、肝色牛排菌 Fistulina hepatica釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小鼠胰島素瘤細胞大豆慢生根瘤菌

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum人骨髓間充質干細胞（hMSCs）

干酪桿菌 Lactobacillus casei異常漢遜酵母 Hansenula anomala

Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

酒假絲酵母 Candida kefyrCOS-7(非洲綠猴SV40轉化的腎細胞)

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum皺褶假絲酵母 Candida rugosa

MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞植物桿菌 Lactobacillus plantarum

丁酸梭菌 Clostridium butylicumEBV-轉化人淋巴細胞

小鼠尿道上皮細胞培養試劑盒說明書(S)-3-甲酸甲酯鹽酸鹽分子式：65.6798英文名稱：(S) -3- methyl piperidine hydrochloride：分子量： C6H2ClNO2

2--3-氟吡分子式：2.英文名稱：2- amino -3-：277-95-3分子量： C5H5FN2

異辛酸鉀分子式：英文名稱：Potassium potassium：3594-75-3分子量：

2,5-二羥磺酸鉀分子式：228.26英文名稱：2,5- two hydroxy benzene sulfonic acid：2799-87-分子量： C6H5KO5S

2-丁-3-(4-羥甲酰)-5-硝并呋喃分子式：339.34英文名稱：2- butyl -5- (4- hydroxy group) -3- nitrobenzene and the：4645-6-分子量： C9H7NO5

(R)--Boc-3-氨甲分子式：24.3英文名稱：(R) --Boc-3- ammonia methyl piperidine：40645-23-4分子量： CH22N2O2

十三烷分子式：260.46英文名稱：Thirteen benzene：23-02-4分子量： C9H32

N-丙咪唑分子式：08.4英文名稱：N- vinyl：340-0-2分子量： C6H8N2

,3-二亞并異吲哚啉分子式：95.23英文名稱：,3- two amino benzene and ISO：65558-69-2分子量： C2H9N3

赤蘚紅英文名稱：Erythrosine分子式：879.86分子量： C20H6I4Na2O5：568-63-8

注意事項：
. 接收到小鼠尿道上皮細胞培養試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。