人小腦顆粒細(xì)胞試劑盒培養(yǎng)

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人小腦顆粒細(xì)胞試劑盒【Human Brain PrimacellTM：Normal Cerebellar Granule Cells】
     人小腦顆粒細(xì)胞試劑盒培養(yǎng)顆粒細(xì)胞層在小腦形成的早期分離出來(lái)，并只產(chǎn)生顆粒細(xì)胞。小腦顆粒細(xì)胞是腦中數(shù)量多的神經(jīng)元。 雖然人小腦機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的人小腦分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的薄的人小腦片能使得人小腦中人小腦顆粒細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將人小腦顆粒細(xì)胞分離開(kāi)來(lái)。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的人小腦顆粒細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的人小腦顆粒細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 人小腦顆粒細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的成人小腦細(xì)胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM人小腦顆粒細(xì)胞組織解離液（3×ml） （2）人小腦顆粒細(xì)胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM人小腦顆粒細(xì)胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）人小腦洗液 (5 x 00 ml) （5）人小腦顆粒細(xì)胞生長(zhǎng)因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）人小腦顆粒細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (5 x 00ml) （7）人成人小腦預(yù)備液 ( x 00 ml) （8）人小腦顆粒細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
培養(yǎng)步驟：
人小腦顆粒細(xì)胞試劑盒培養(yǎng)對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

新型隱球酵母 Cryptococcus neoformans香菇 Lentinula edodes

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維蘇云金芽胞桿菌猝倒亞種 Bacillus thuringiensis subsp. sotto

泡盛曲霉 Aspergillus awamori小鼠支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

HCCC-980(人肝內(nèi)膽管細(xì)胞)香菇 Lentinula edodes

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae3T3-L, 小鼠前脂肪細(xì)胞

黑曲霉 Aspergillus niger特異青霉(點(diǎn)青霉) Penicillium notatum

大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基苜蓿中華根瘤菌

酸球菌脂亞種 Lactococcus lactis subsp. cremorisRDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞

小鼠膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基屎腸球菌 Enterococcus faecium

膨端青霉 Penicillium inflatum苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

人小腦顆粒細(xì)胞試劑盒培養(yǎng)2-溴-5-氯三氟甲分子式：259.45英文名稱：2- -5- three f：344-65-0分子量： C7H3BrClF3

2--4-羥吡分子式：0.英文名稱：2- amino -4- hydroxy pyridine：3363-05-9分子量： C5H6N2O

六氟磷酸鉀分子式：84.07英文名稱：Six potassium fluoride：7084-3-8分子量： KF6P

4,4’-二甲聯(lián)分子式：82.27英文名稱：4,4 '- two methyl group：63-33-2分子量： C4H4

5,6-二甲氧-2-甲并噻唑分子式：209.26英文名稱：5,6- two -2- methoxy methyl benzothiazole：62306-04-分子量： C0HNO2S

牡荊素葡萄糖苷英文名稱：Vitexin glucoside分子式：594.52分子量：C27H30O5：7635-82-5

鋅試劑英文名稱：Zinc reagent分子式：440.43分子量： C20H6N4O6S：35-52-4

擬人參皂苷RT5英文名稱：Human RT5分子式：654.88228分子量：C36H62O0：98474-78-3

,3,5-三[(3-吡)-3-]分子式：英文名稱：,3,5- three [(3-) -3- phenyl] benzene：92205-03-0分子量：

對(duì)氯三氟甲分子式：80.6英文名稱：To three f：98-56-6分子量： C7H4ClF3

注意事項(xiàng)：
. 接收到人小腦顆粒細(xì)胞試劑盒培養(yǎng)，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。