人小腦顆粒細胞試劑盒培養(yǎng)

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人小腦顆粒細胞試劑盒【Human Brain PrimacellTM：Normal Cerebellar Granule Cells】
     人小腦顆粒細胞試劑盒培養(yǎng)顆粒細胞層在小腦形成的早期分離出來，并只產(chǎn)生顆粒細胞。小腦顆粒細胞是腦中數(shù)量多的神經(jīng)元。 雖然人小腦機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的人小腦分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的人小腦片能使得人小腦中人小腦顆粒細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將人小腦顆粒細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的人小腦顆粒細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的人小腦顆粒細胞中成纖維細胞的含量。 人小腦顆粒細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的成人小腦細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM人小腦顆粒細胞組織解離液（3×ml） （2）人小腦顆粒細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM人小腦顆粒細胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）人小腦洗液 (5 x 00 ml) （5）人小腦顆粒細胞生長因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）人小腦顆粒細胞基礎培養(yǎng)基 (5 x 00ml) （7）人成人小腦預備液 ( x 00 ml) （8）人小腦顆粒細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟：
人小腦顆粒細胞試劑盒培養(yǎng)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

新型隱球酵母 Cryptococcus neoformans香菇 Lentinula edodes

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維蘇云金芽胞桿菌猝倒亞種 Bacillus thuringiensis subsp. sotto

泡盛曲霉 Aspergillus awamori小鼠支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基

HCCC-980(人肝內(nèi)膽管細胞)香菇 Lentinula edodes

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae3T3-L, 小鼠前脂肪細胞

黑曲霉 Aspergillus niger特異青霉(點青霉) Penicillium notatum

大鼠淋巴管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基苜蓿中華根瘤菌

酸球菌脂亞種 Lactococcus lactis subsp. cremorisRDFs, 大鼠真皮成纖維細胞

小鼠膀胱成纖維細胞*培養(yǎng)基屎腸球菌 Enterococcus faecium

膨端青霉 Penicillium inflatum苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

人小腦顆粒細胞試劑盒培養(yǎng)2-溴-5-氯三氟甲分子式：259.45英文名稱：2- -5- three f：344-65-0分子量： C7H3BrClF3

2--4-羥吡分子式：0.英文名稱：2- amino -4- hydroxy pyridine：3363-05-9分子量： C5H6N2O

六氟磷酸鉀分子式：84.07英文名稱：Six potassium fluoride：7084-3-8分子量： KF6P

4,4’-二甲聯(lián)分子式：82.27英文名稱：4,4 '- two methyl group：63-33-2分子量： C4H4

5,6-二甲氧-2-甲并噻唑分子式：209.26英文名稱：5,6- two -2- methoxy methyl benzothiazole：62306-04-分子量： C0HNO2S

牡荊素葡萄糖苷英文名稱：Vitexin glucoside分子式：594.52分子量：C27H30O5：7635-82-5

鋅試劑英文名稱：Zinc reagent分子式：440.43分子量： C20H6N4O6S：35-52-4

擬人參皂苷RT5英文名稱：Human RT5分子式：654.88228分子量：C36H62O0：98474-78-3

,3,5-三[(3-吡)-3-]分子式：英文名稱：,3,5- three [(3-) -3- phenyl] benzene：92205-03-0分子量：

對氯三氟甲分子式：80.6英文名稱：To three f：98-56-6分子量： C7H4ClF3

注意事項：
. 接收到人小腦顆粒細胞試劑盒培養(yǎng)，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。