人卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書

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人卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Human Ovary PrimacellTM：Normal Ovarian Firbroblasts】
     人卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書人卵巢成纖維細(xì)胞分離自正常人卵巢結(jié)締組織。其中，卵巢成纖維細(xì)胞主要功能：（）成纖維細(xì)胞在體外易于培養(yǎng)。（2）卵巢損傷后，成纖維細(xì)胞能修復(fù)和重塑卵巢。（3）能在卵巢炎癥時(shí)有效控制炎癥擴(kuò)散。 雖然卵巢結(jié)締組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的卵巢結(jié)締組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的卵巢結(jié)締組織片能使得卵巢結(jié)締組織中成纖維細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成纖維細(xì)胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的卵巢成纖維細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。 人卵巢成纖維細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的卵巢成纖維組織細(xì)胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM人卵巢成纖維細(xì)胞組織解離液（3×ml） （2）人卵巢成纖維細(xì)胞組織處理緩沖液（00ml） （3）人卵巢成纖維組織洗液(5 x 00 ml) （4）人卵巢成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（ml500X）及血清（5x0ml） （5）人卵巢成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x 00ml) （6）人卵巢成纖維組織預(yù)備液 ( x 00 ml) （7）人卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟：
人卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

植物桿菌 Lactobacillus plantarumKU82(人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞)

三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii土壤桿菌屬 Agrobacterium sp.

SW 353(人骨肉瘤細(xì)胞)產(chǎn)油油脂酵母 Lipomyces lipofer

暗鱗白鬼傘 Leucocoprinus bresadolae中國(guó)臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis

人胃粘膜細(xì)胞小雙孢菌 Microbispora sp.

RBE, 人肝膽管細(xì)胞人非小細(xì)胞肺細(xì)胞

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis葡枝根霉 Rhizopus stolonifer

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum貝葉多孔菌

Ca Ski(人宮頸上皮細(xì)胞)麥角甾苷

爪哇根霉 Rhizopus javanicus大鼠小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基

人卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書6-氯-2-甲喹啉分子式：77.63英文名稱：6- -2- methyl group：92-46-6分子量： C0H8ClN

過氧鍶分子式：9.6英文名稱：Strontium oxide：34-8-7分子量： SrO2

(S)-3-雙鹽酸鹽分子式：73.08英文名稱：(S) -3- 3-aminopiperidine 2HCl：33468-07-4分子量： C5H4Cl2N2

甲達(dá)唑分子式：295.29英文名稱：Mebendazole：343-39-7分子量： C6H3N3O3

N-乙-3-羥分子式：29.2英文名稱：N- -3- hydroxy ethyl piperidine：3444-24-分子量： C7H5NO

性黃7英文名稱：Acid yellow 7分子式：55.29分子量： C6H0Cl2N4Na2O7：6359-98-4

四氫巴馬汀英文名稱：Four Martin分子式：分子量：：6024-83-5

白樺脂英文名稱：Betulinic acid分子式：456.70032分子量：C30H48O3：472-5-

性ATT英文名稱：Acid black ATT分子式：分子量：：

對(duì)氯甲并噁唑分子式：243.69英文名稱：The chloromethyl phenyl benzoxazole：57864-9-4分子量： C4H0ClNO

注意事項(xiàng)：
. 接收到人卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。