小鼠雜交瘤細胞株；3D-2A0-IgG說明書

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細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞株；3D-2A0-IgG說明書
形態特性 母細胞樣

生長特性 懸浮生長

特征特性 該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。

培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 0%FBS

傳代方法 :3傳代，3-4天傳次

傳代情況 C5

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 陰性

STR

同工酶

染色體

主要功能：
（）小鼠雜交瘤細胞株；3D-2A0-IgG說明書血管平滑肌細胞的再生能力是原發血管病變的重要因素。
（2）表達鈣通道及ICAM-和VCAM-，參與血管壁的炎癥反應。
（3）與血管疾病的進展和穩定有關。
 生理變化：
（）主動脈硬化。
（2）主動脈瘤
（3）主動脈鈣化。
基本特性：
（）小鼠雜交瘤細胞株；3D-2A0-IgG說明書組織來源于正常大鼠大動脈組織。
（2）鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細胞培養末期液氮凍存。
（4）每凍存管細胞數：>5×05 cells/ml。
（5）肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
（6）不含有HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

運輸和保存：
小鼠雜交瘤細胞株；3D-2A0-IgG說明書視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
)mL凍存細胞懸液裝于.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
具體操作：
.預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS液和的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。
2.用75％酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械：保證足夠的*作空間，不僅便于*作而且可減少污染。
4.點燃酒精燈：注意火焰不能太小。
5.準備好將要使用的消毒后的空培養瓶，放入微波爐內高火，8分鐘再次消毒。
6.取出預熱好的培養用液：大鼠主動脈平滑肌細胞取出已經預熱好的培養用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。
7.從培養箱內取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞。
8.打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。?

Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM    25 Test *

Granzyme B / GZMB 抗體, 鼠單抗 ELISA   IHC-P    50 µg *

HNF--alpha / HNFA 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IF   ICC/IF    50 µg *

HSP27 / HSPB 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB  IHC-P   IP    50 µg *

SPINT2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg *

ECM 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µL *

Endoglin / CD05 / ENG 抗體 (PE), 兔單抗 FCM    25 Test *

PIGR 抗體, 兔單抗 IHC-P    50 µg *

TNF-beta / TNFSF / Lymphotoxin alpha 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µL *

Contactin 3 / CNTN3 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg *

K-Ras 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 µg *

ADAM0 / CD56c 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 µg *

小鼠雜交瘤細胞株；3D-2A0-IgG說明書直接猩紅英文名稱：Direct Scarlet分子式：676.63分子量： C30H22N4Na2O8S2：3530-9-6

橙提取物英文名稱：Lime extract分子式：分子量：：72968-50-4

5-氟尿嘧分子式：30.08英文名稱：5-：5-2-8分子量： C4H3FN2O2

鹽黃連堿英文名稱：Huang Lianjian hydrochloride分子式：355.7776分子量：C9H4ClNO4+：6020-8-4

洋紅英文名稱：Carmine acid分子式：492.39分子量： C22H20O3：260-7-9

,2-二分子式：28.3英文名稱：,2- two cyanobenzene：9-5-6分子量： C8H4N2

2-甲硫吡分子式：25.9英文名稱：2- a sulfur based pyridine：8438-38-5分子量： C6H7NS

綠谷隆英文名稱：Monolinuron分子式：24.65分子量：C9HClN2O2：746-8-2

性紅33英文名稱：Acid red 33分子式：467.38分子量： C6HN3Na2O7S2：3567-66-6

氘代對二甲-d分子式：6.23英文名稱：Deuterated xylene -d：405-88-分子量： C8D0

4-氯聯分子式：88.65英文名稱：4- chloride：205-62-9分子量： C2H9Cl

操作流程：
. 小鼠雜交瘤細胞株；3D-2A0-IgG說明書主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-43），co2孵箱（日本yamato it-6）。
.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存：
.2. 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液（37℃預熱，8～0倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以×05/ml密度接種于25cm2培養瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養。
.2.2 細胞傳代 原代培養的hek－293細胞48h換液次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化～2min，將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
.4 細胞的計數 常規消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用0×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×04。
.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞，以0.25％消化成單細胞懸液，計數后分別接種于2個25cm2培養瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×00％，計算貼壁率。 
.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液，以×04/孔接種于24孔板，每孔加入ml培養基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數0d，繪制細胞生長曲線