小鼠雜交瘤細(xì)胞；ZMA說明書

操作流程：
. 小鼠雜交瘤細(xì)胞；ZMA說明書主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-43），co2孵箱（日本yamato it-6）。
.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
.2. 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～0倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以×05/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%消化～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用0×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×04。
.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于2個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×00％，計(jì)算貼壁率。 
.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以×04/孔接種于24孔板，每孔加入ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)0d，繪制細(xì)胞生長曲線

本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)小鼠雜交瘤細(xì)胞；ZMA說明書說明書！

細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；ZMA說明書
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣

生長特性 半貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件 RPMI 640 (w/o Hepes) 0%FBS

傳代方法 :3傳代，3-4天傳次

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 陰性

STR

同工酶

染色體

主要功能：
（）小鼠雜交瘤細(xì)胞；ZMA說明書血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達(dá)鈣通道及ICAM-和VCAM-，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
 生理變化：
（）主動脈硬化。
（2）主動脈瘤
（3）主動脈鈣化。
基本特性：
（）小鼠雜交瘤細(xì)胞；ZMA說明書組織來源于正常大鼠大動脈組織。
（2）鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每凍存管細(xì)胞數(shù)：>5×05 cells/ml。
（5）肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

運(yùn)輸和保存：
小鼠雜交瘤細(xì)胞；ZMA說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
)mL凍存細(xì)胞懸液裝于.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存?zhèn)€月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
具體操作：
.預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱。
2.用75％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械：保證足夠的*作空間，不僅便于*作而且可減少污染。
4.點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小。
5.準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶，放入微波爐內(nèi)高火，8分鐘再次消毒。
6.取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液：大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞取出已經(jīng)預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)。
7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞：注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細(xì)胞。
8.打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。
? CAS 5-53-7 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

酚-3-O-β-D-槐糖苷 CAS 9895-95-5 訂購|咨詢  規(guī)格： 0mg

 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 2.5LT 25ML 500ML;99+%

異蓮心堿 CAS 687-4-0 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

對甲氧基桂酸乙酯 CAS 24393-56-4 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

蒼術(shù)素醇 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

羥苯丁酯 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 00mg

膽石酸 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 50mg

崗松 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： g

木香 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 0.5g

靈芝酸A;Gaderic acid CAS 8907-62-2 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

丙那林 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 50mg

小鼠雜交瘤細(xì)胞；ZMA說明書GP65/SDFR/NPTN  間質(zhì)細(xì)胞衍化因子受體抗體 規(guī)格: 0.mlUSP3  去泛素化酶3抗體 0.2ml

ARSH  芳香基硫酸酯酶H抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-CHK2 (ser33)  磷酸化細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶2抗體 規(guī)格: 0.ml

Phospho-Vimentin (Ser56)  磷酸化波形蛋白抗體 規(guī)格: 0.ml

phospho-HSF(Ser307)  磷酸化熱休克因子抗體 規(guī)格: 0.mlphospho-Cdc6 (Ser54)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體 規(guī)格: 0.ml

PTPN7/HePTP  非受體型蛋白磷酸酶7抗體 規(guī)格: 0.2ml

Integrin beta 3/CD6  整合素β3抗體 規(guī)格: 0.ml

Phospho-5-Lipoxygenase(Ser663)  磷酸化5-脂氧合酶抗體 0.ml

APOJ/Clusterin  載脂蛋白J抗體 規(guī)格: 0.ml

phospho-IKK beta(Ser740)  磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 規(guī)格: 0.ml

CCL9/CCL0/MIP- gamma/SCYA0  巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-γ抗體 規(guī)格: 0.ml

GRP75  G蛋白偶聯(lián)受體75抗體 規(guī)格: 0.2ml