野生型人c-kit受體細(xì)胞株；A7d說明書

操作流程：
. 野生型人c-kit受體細(xì)胞株；A7d說明書主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-43），co2孵箱（日本yamato it-6）。
.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
.2. 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～0倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以×05/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%消化～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用0×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×04。
.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于2個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×00％，計(jì)算貼壁率。 
.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以×04/孔接種于24孔板，每孔加入ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)0d，繪制細(xì)胞生長曲線

本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)野生型人c-kit受體細(xì)胞株；A7d說明書說明書！

細(xì)胞名稱 野生型人c-kit受體細(xì)胞株；A7d說明書
形態(tài)特性 圓形

生長特性 懸浮生長

特征特性 該細(xì)胞株由陳松森教授實(shí)驗(yàn)室建立。野生c-kit基因轉(zhuǎn)染小鼠骨髓細(xì)胞FDC-P，細(xì)胞表面表達(dá)c-kit（人干細(xì)胞因子受體）。

培養(yǎng)條件 RPMI 640 (w/o Hepes) 0%FBS；IL-3

傳代方法 :3傳代；3~4天次。

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）

STR -

同工酶

染色體

主要功能：
（）野生型人c-kit受體細(xì)胞株；A7d說明書血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達(dá)鈣通道及ICAM-和VCAM-，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
 生理變化：
（）主動(dòng)脈硬化。
（2）主動(dòng)脈瘤
（3）主動(dòng)脈鈣化。
基本特性：
（）野生型人c-kit受體細(xì)胞株；A7d說明書組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)：>5×05 cells/ml。
（5）肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

運(yùn)輸和保存：
野生型人c-kit受體細(xì)胞株；A7d說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
)mL凍存細(xì)胞懸液裝于.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存?zhèn)€月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
具體操作：
.預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱。
2.用75％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手。
3.正確擺放使用的器械：保證足夠的*作空間，不僅便于*作而且可減少污染。
4.點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小。
5.準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶，放入微波爐內(nèi)高火，8分鐘再次消毒。
6.取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液：大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞取出已經(jīng)預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺(tái)內(nèi)。
7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞：注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺(tái)面，再在鏡下觀察細(xì)胞。
8.打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。?

基苯酞;n-Butylideneph CAS 55-08-6 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

芒果苷 CAS 4773-96-0 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

一葉萩堿 CAS 560-40-2 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： ;

土荊皮乙酸 CAS 82508-3-4 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

染料木苷 CAS 529-59-9 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

人參皂苷 F CAS 53963-43-2 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

苦杏仁苷;Amygdalin CAS 29883-5-6 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

內(nèi)酯 CAS 5508-58-7 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

異牡荊苷 CAS 29702-25-8 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

知母皂苷A-Ⅲ CAS 4059-79-4 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

纖維蛋白溶酶原（牛血）（牛纖溶酶原） CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 0U/支

野生型人c-kit受體細(xì)胞株；A7d說明書SELS  炎癥負(fù)調(diào)控因子蛋白抗體 規(guī)格: 0.ml

Phospho-PPIG (Ser376)  磷酸化親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-eNOS(Ser77)  磷酸化氮合成酶3抗體（內(nèi)皮型） 規(guī)格: 0.ml

B3GALNT  β，3半糖轉(zhuǎn)移酶3抗體 規(guī)格: 0.2ml

PITX3  炎癥因子3抗體（穿透素） 規(guī)格: 0.2ml

CNIH3/CNIH2  cornichon樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

FES  原基因蛋白激酶FES抗體 規(guī)格: 0.2ml

Collagen XI alpha 2  膠原蛋白A2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Goat IgM/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgM 規(guī)格: 0.ml

IL-2  白介素2抗體 規(guī)格: 0.2ml

CRTAM  CRTAM抗體 規(guī)格: 0.2ml