小鼠腎集合管細胞（SV40轉(zhuǎn)化）；M-說明書

操作流程：
. 小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-說明書主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-43），co2孵箱（日本yamato it-6）。
.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
.2. 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～0倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以×05/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用0×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×04。
.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞，以0.25％消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于2個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×00％，計算貼壁率。 
.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液，以×04/孔接種于24孔板，每孔加入ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)0d，繪制細胞生長曲線

本公司提供的細胞都是現(xiàn)貨供應，詳細小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-說明書說明書！

細胞名稱 小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-說明書
形態(tài)特性 上皮樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞源于tg(SV40E)Bri7轉(zhuǎn)基因小鼠的正常腎組織，含SV40病毒的DNA序列，保留了皮質(zhì)集合管的某些特性，如形態(tài)和CCD（皮質(zhì)結(jié)合管）抗原。大多M-細胞的克隆具有皮質(zhì)集合管中閏細胞或主細胞的特征；5%~0%的細胞有閏細胞和主細胞的雙重表型。當該細胞在滲透性支持物上生長時，可形成具有負跨膜電位差的腔樣結(jié)構(gòu)。

培養(yǎng)條件 DMEM/F2(:): Ham's F2/DME Medium (DME H-6/F-2 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 0%FBS

傳代方法 :3~:4傳代；每周換液2~3次。

傳代情況 C4

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）

STR -

同工酶

染色體

主要功能：
（）小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-說明書血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達鈣通道及ICAM-和VCAM-，參與血管壁的炎癥反應。
（3）與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關(guān)。
 生理變化：
（）主動脈硬化。
（2）主動脈瘤
（3）主動脈鈣化。
基本特性：
（）小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-說明書組織來源于正常大鼠大動脈組織。
（2）鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每凍存管細胞數(shù)：>5×05 cells/ml。
（5）肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
（6）不含有HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

運輸和保存：
小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-說明書視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
)mL凍存細胞懸液裝于.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存?zhèn)€月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
具體操作：
.預熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱。
2.用75％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械：保證足夠的*作空間，不僅便于*作而且可減少污染。
4.點燃酒精燈：注意火焰不能太小。
5.準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶，放入微波爐內(nèi)高火，8分鐘再次消毒。
6.取出預熱好的培養(yǎng)用液：大鼠主動脈平滑肌細胞取出已經(jīng)預熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)。
7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞。
8.打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。?

格洛苷C;Angoroside C CAS 5909-22-3 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

低聚果糖-蔗果四糖;純品型;標準品;有證 CAS 333-07-8 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

蘇丹紅Ⅱ CAS 38-97-6 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

德爾塔林 CAS 80352 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

脫水差向四環(huán)素 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 50mg

醉椒素 CAS 355-48-4 訂購|咨詢  規(guī)格： 0mg

金絲桃苷 CAS 482-36-0 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

乙酰白藜蘆醇 CAS 42206-94-0 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

醇雜質(zhì)Ⅲ CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 50mg

香草醇 CAS 4 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

番瀉葉對照藥材 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： g

魚腥草 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： g

小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-說明書Bile salt-activated lipase  膽鹽激活脂肪酶抗體 規(guī)格: 0.2ml

PIWIL3  piwi樣3蛋白抗體 規(guī)格: 0.ml

Rab7  RAS基因相關(guān)蛋白RAB7抗體 規(guī)格: 0.2ml

p53BP/53BP  p53結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlSmad4  Smad4抗體 規(guī)格: 0.ml

DOG-/TMEM6A  跨膜蛋白6A/鈣激活氯離子通道抗體 規(guī)格: 0.ml

Rabbit Anti-Monkey IgG/FITC  FITC標記的兔抗猴IgG 規(guī)格: 0.3ml

CCDC47  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體 規(guī)格: 0.2ml

ANKRD22  錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體 規(guī)格: 0.2ml

CPT2  肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶2抗體 規(guī)格: 0.2ml

TGF Beta R3  轉(zhuǎn)移生因子β受體3抗體（TGF-βRⅢ） 規(guī)格: 0.mlPLEKHM3  小板白細胞C激酶底物同源結(jié)構(gòu)域M3抗體 規(guī)格: 0.2ml

STAT4  信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體 規(guī)格: 0.ml