溴化乙錠干粉 （EB）g說明書

操作步驟：
  溴化乙錠干粉 (EB)g說明書切取含有目的DNA 片段的瓊脂糖凝膠條帶。
   ● 盡量切除不含有目的DNA 部分的凝膠，減少凝膠體積，提高DNA 回收率。
   ● 切膠時，請使用長波長UV  （360 nm ）光盒。且不要將DNA 長時間暴露在紫外燈下，以防DNA 損傷。
2  稱取凝膠的重量近似地確定其體積。
   ● 凝膠重量的稱量方法：取.5 ml 離心管電子天平稱初質量，切膠裝在離心管后稱終質量，兩者差即為膠的質量。不同離心管的重量可能有差異，因此，每個離心管的重量需單獨稱量。
3  按照每00 mg 瓊脂糖凝膠對應00 µl 溶液BD 的比例，向離心管中加入溶液BD。
4  50 ℃水浴7-0min，直至凝膠*溶化。期間需要振蕩混合3 次。
   ● 瓊脂糖必須*融化，以免堵塞柱子，嚴重影響DNA 段的回收效率。
   ● 如果總體積大于500 µl，可適當增加溶膠時間。
   ● 若此時溶液變紅，可加0 µl 3M NaAC  （pH 5.2）。
5  將步驟4 所獲溶液置于DNA 純化柱中，靜置2min 。
   ● 膠塊*溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱，因為純化柱在較高溫度時結合DNA  的能力較弱。
6  2,000 rpm 離心min。若溶液量大于DNA 純化柱的容積，可分兩次離心，棄濾液。
   ● 此時DNA 被吸附于DNA 純化柱中的硅膠膜上。
7  加入500 µl 溶液BD。2,000 rpm,  離心min，棄濾液
8  加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm,  離心min，棄濾液。
   ● 溶液PE 初次使用前用無水乙醇按: 4 稀釋，即含80% 乙醇。
   ● 此步驟的作用是將硅膠膜上吸附的蛋白、鹽等雜質洗脫，以獲得高質量DNA 段。
9  加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm,  離心min，棄濾液。
0 2,000 rpm 離心  3min ，以*去除純化柱中的液體。
   ● 此步驟的作用是去除殘留乙醇，避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DNA 段的充分溶解。
  將離心柱置于新的.5 ml 離心管中。向純化柱的處，懸空滴加30-00 µl 溶液Eluent  （60℃預熱），靜置2min 。2,000 rpm  離心min，管底即為目的DNA 段。貯存于-20℃。
   ● 溶液Eluent 可用無菌雙蒸水代替，但其pH 需為8.0-8.5，加入體積視DNA 目的段的多少、用戶對目的濃度要求而定。
   ● 對溶液Eluent 60℃預熱，會提高提取DNA 目的段的產量。

以下是溴化乙錠干粉 (EB)g說明書的訂購信息!了解更多核酸電泳及回收點擊進入。

?
注意事項：
溴化乙錠干粉 (EB)g說明書● 溶液PE *次使用前請按瓶上標簽加入4 倍體積的無水乙醇，即5 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇，20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇，使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴格限制，可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質量和DNA 回收效率，希望使用高純度的Agarose ，但沒有必要一定要使用低熔點的Agarose 等。
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液，以免影響電泳及回收效果。
● 請適當延長電泳時間，在條帶分離清晰后進行切膠回收，以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率，切膠時應盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強。但如果DNA 濃度小，或DNA 初始量少，回收率將會偏低。
● 溶液Eluent（0 mM Tris-HCl, pH 8.5）中不含EDTA，其收集的DNA 片段可直接用于各種酶促反應等，不會影響后續試驗。
● 為了保證回收效率，請不要使用未調整pH 值的超純水洗脫目的片段。
● 請嚴格按照操作步驟操作。

問：常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些？
溴化乙錠干粉 (EB)g說明書答：回收得到的DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度；紫外分光檢測OD260/280 比值，OD260/280 比值在.7-.9 之間說明所得  DNA  純度較好，如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水，比值會偏低，因為pH 值和離子存在會影響光吸收值，但不表示純度低。

問：長片段回收時應注意哪些問題？
答：溴化乙錠干粉 (EB)g說明書當DNA 片段長度較長（5   kb 以上）時，回收效率會有所下降，這是DNA 切膠回收時的常見現象。此時建議按以下方法解決問題：
    適當增加待回收DNA 樣品的點樣量；
    2 由于長片段DNA 不易從樹脂上洗脫下來，建議洗脫兩次，可以提高洗脫效率；
    3 減少操作過程中對長片段DNA 的物理損傷，如混合振蕩操作不要過于劇烈，切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。

銀杏內酯B CAS 529-77-7 訂購|咨詢  規格： 20mg

異補骨脂素 CAS 523-50-2 訂購|咨詢  規格： HPLC≥98%,20mg/支

歐前胡素 CAS 482-44-0 訂購|咨詢  規格： 20mg

反式茴香腦 CAS 04-46- 訂購|咨詢  規格： 20mg

知母皂苷元;Sarsasapogenin CAS 82597-74-8 訂購|咨詢  規格： 20mg

絡塞維;Rosavin CAS 84954-92-7 訂購|咨詢  規格： 20mg

瞿麥對照藥材 CAS  訂購|咨詢  規格： g

四唑;純品型;標準品;有證書 CAS 228-77-3 訂購|咨詢  規格： 0.g

正常人血免疫球蛋白品 CAS  訂購|咨詢  規格： 87 IU/支

0-羥基攀援山橙堿 CAS 988-47-5 訂購|咨詢  規格： HPLC≥98%;20mg

索他洛爾 CAS 959-24-0 訂購|咨詢  規格： 00mg

溴化乙錠干粉 (EB)g說明書血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)elisa檢測試劑盒 英文名稱：VEGF-C ELISA Kit， 英文縮寫：VEGF-C，

分揀連接蛋白9(SNX9)elisa檢測試劑盒 英文名稱：SNX9 ELISA Kit， 英文縮寫：SNX9，

-(CYC)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CYC ELISA Kit， 英文縮寫：CYC，

CD7分子(CD7)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CD7 ELISA Kit， 英文縮寫：CD7，

組織基質金屬蛋白酶（MMP-9）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

細胞糖原磷酸化酶b（GLYCOGEN PHOSPHORYLASE）活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：0次

細胞游離毛地黃皂苷法（DIGITONIN）高氯酸萘醌（PAN）染色試劑盒 進口/國產 規格：50次

載玻片細胞組蛋白H3-K9甲基化熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產 規格：0/20次

Akirin蛋白(AKIRIN)elisa檢測試劑盒 英文名稱：AKIRIN ELISA Kit， 英文縮寫：AKIRIN，

細菌半乳糖總含量酶連續循環反應比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

細胞內核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）比色法測定試劑盒 進口/國產 規格：20次