大鼠角膜成纖維細胞培養

注意事項：
. 接收到大鼠角膜成纖維細胞培養，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

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大鼠角膜成纖維細胞【RatEye:NormalCornealFibroblasts】
    大鼠角膜成纖維細胞培養 產品描述：大鼠角膜成纖維細胞是結締組織中常見的一種細胞，其功能是可在角膜創傷后修復組織。公司提供的大鼠角膜成纖維細胞，采用消化制備而來。細胞的培養采用公司產品大鼠角膜成纖維細胞培養試劑盒(RatEyePrimaCell™：NormalCornealFibroblastsCatNo.3-7505)來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞等）的污染，同時保證質量的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，大鼠角膜成纖維細胞傳0代仍可以保持原代細胞的分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。
      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。?

異常畢赤酵母 Pichia anomala球擬圓酵母 Torulopsis globosa

家貓肺成纖維樣細胞小鼠腺腫瘤細胞

小鼠海馬神經膠質細胞（EGFP標記）大鼠成骨細胞*培養基

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

HLF-a(人肺細胞)MADB06(大鼠腺細胞)

瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

刺孢吸水鏈霉菌 Streptomyces hygrospinosus佛羅里達側耳 Pleurotus florida

大鼠腎細胞小鼠肥大細胞細胞

檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum人小腦顆粒細胞*培養基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

大鼠角膜成纖維細胞培養4,4'-二分子式：68.28英文名稱：4,4'- two piperidine：5336-72-8分子量： C0H20N2

-(3-丙)咪唑分子式：25.7英文名稱： -（3 -丙）咪唑：5036-48-6分子量： C6HN3

雙(2-甲-3-呋喃)二分子式：226.3英文名稱：Bis (2- -3-) two：28588-75-2分子量： C0H0O2S2

5-氟硝分子式：23.06英文名稱：5- f：880-78-4分子量： C6F5NO2

2-氯-5-甲氧并咪唑分子式：82.6英文名稱：2- chloro -5- methoxy benzimidazole：5965-54-5分子量： C8H7ClN2O

3,4-二氯甲分子式：6.03英文名稱：3,4- two：95-75-0分子量： C7H6Cl2

漢英文名稱：Chinese baicalin分子式：460.4分子量： C22H20O：5059-44-0

性嫩黃G英文名稱：Acid yellow G分子式：380.35分子量： C6H3N4NaO4S：6359-82-6

6--2-硫脲嘧分子式：43.7英文名稱：6- amino -2-：004-40-6分子量： C4H5N3OS

蕓香柚皮苷英文名稱：Yun grapefruit peel glucoside分子式：580.535分子量： C27H32O4：4259-46-2

培養步驟：
大鼠角膜成纖維細胞培養對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。