大鼠氣管和支氣管上皮細胞培養(yǎng)

注意事項：
. 接收到大鼠氣管和支氣管上皮細胞培養(yǎng)，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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大鼠氣管和支氣管上皮細胞【RatAirway:NormalBronchialandTrachealEpithelialCells】
    大鼠氣管和支氣管上皮細胞培養(yǎng) 產(chǎn)品描述：呼吸道上皮細胞是由纖毛、無纖毛和能分泌黏液的細胞按照從近端到遠端呼吸道分布的混合細胞群組成。這類細胞的各個亞型細胞各具特點，從而不僅能形成物理屏障，可有效的防止多種有毒物質(zhì)，而且通過產(chǎn)生和分泌大量化學介質(zhì)和細胞因子形成高度復雜的宿主防御系統(tǒng)。支氣管上皮由表面的上皮細胞和粘液腺體組成。表面的上皮細胞由基細胞，杯狀細胞和纖毛細胞三種細胞構成，形成了基底柱狀結構，并能清除粘液纖毛。用支氣管上皮細胞培養(yǎng)分化誘導纖毛表型的研究顯示，IL-4和IL-3的刺激能改變增殖、纖毛運動、黏液分泌等一系列細胞功能。支氣管上皮細胞增殖以及其它細胞過程也部分受到EGF受體信號的調(diào)節(jié)。支氣管上皮細胞的培養(yǎng)為我們研究這類細胞的功能和病理生理機制提供了一個體外模型。公司提供的大鼠氣管和支氣管上皮細胞，均來自新鮮組織。細胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品大鼠氣管和支氣管上皮細胞培養(yǎng)試劑盒(RatAirwayPrimaCell™:NormalBronchialandTrachealEpithelialCellsCatNo.3-7064)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下，大鼠氣管和支氣管上皮細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。
      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。?

CTLL-2(小鼠T細胞)貝葉多孔菌

爪哇根霉 Rhizopus javanicus人非小細胞肺細胞

惡臭假單胞菌 Pseudomonas putida葡枝根霉 Rhizopus stolonifer

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus小檗堿

鏈輪枝菌 Streptoverticillium sp.大鼠小腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基

Western Blot封閉液Ⅰ(BSA,pH7.5)/Blocking Buffer(BSA)異常漢遜酵母 Hansenula anomala

暫無 Brevibacterium thiogenitalis涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis

肺形側耳(鳳尾菇) Pleurotus pulmonariusNCI-H76(人結直腸腺細胞)

神經(jīng)母細胞瘤融粘帚霉 Gliocladium deliguescens

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

大鼠氣管和支氣管上皮細胞培養(yǎng)4，5-二嘧分子式：0.2英文名稱：4, 5- two：3754-9-3分子量： C4H6N4

,4-二(3-甲氧氧)分子式：322.36英文名稱：,4- two (3- a) benzene：5024-84-0分子量： C20H8O4

-甲-4-吡唑分子式：208英文名稱：甲- 4 -吡唑：39806-90-分子量： C4H5IN2

分子式： 29,63英文名稱：The Ordovician：6773-42-5分子量： C7H0CIN3O3

2-甲-5-溴吡分子式：72.02英文名稱：2- methyl -5-：3430-3-5分子量： C6H6BrN

5-溴-2-氟吡分子式：75.99英文名稱：5- bromide -2-：766--0分子量： C5H3BrFN

3,4,5-三氯吡分子式：82.44英文名稱：3,4,5- three：3326-52-3分子量： C5H2Cl3N

硝酸布康唑分子式：474.79英文名稱：Nitric acid：64872-77-分子量： C9H8Cl3N3O3S

氯,3-二甲咪唑分子式：32.59英文名稱：Chlorinated ,3- two：7997-88-7分子量： C5H9ClN2

戊醛2,4-二硝分子式：266.25英文名稱：4-dinitrophenylhydrazine aldehyde 2,4- two：2057-84-3分子量： CH4N4O4

培養(yǎng)步驟：
大鼠氣管和支氣管上皮細胞培養(yǎng)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。