人肺大靜脈內皮細胞培養

注意事項：
. 接收到人肺大靜脈內皮細胞培養，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

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人肺大靜脈內皮細胞【HumanLung:PulmonaryVeinEndothelialCells】
    人肺大靜脈內皮細胞培養 產品描述：人肺靜脈內皮細胞提取于人肺組織，肺大靜脈內皮細胞主要有維持血管內外的動態平衡，合成和分泌細胞因子和介質，維持凝血和纖溶的動態平衡等功能。公司提供的人肺大靜脈內皮原代細胞均來自新鮮組織，用于培養人肺大靜脈內皮原代細胞的組織采集于地方醫院，組織的采集根據公司批準的方案進行。細胞的培養采用公司產品人肺大靜脈內皮細胞培養試劑盒(HumanLungPrimaCell™:PulmonaryVeinEndothelialCellsCatNo.3-007)來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時保證質量的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，人肺大靜脈內皮原代細胞可以保持原代細胞的分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。
      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

東京根霉 Rhizopus tonkinensis蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarumRL95-2, 人子宮內膜腺細胞系

MDA-MB-453(人腺細胞)鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

美味絲葚霉 Papulaspora sapidusU4-GFP(小鼠子宮頸細胞)

前列腺小刺青霉 Penicillium spinulosum

奇異變形桿菌 Proteus mirabilis諾卡氏菌 Nocardia sp.

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum-(00X)

SK-BR-3(人腺細胞)MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞

桿菌屬 Lactobacillus sp.異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala

根瘤菌豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

人肺大靜脈內皮細胞培養環黃芪英文名稱：Ring of Astragalus分子式：490.7分子量： C30H50O5：84605-8-5

黃芪皂苷IV英文名稱：Astragalus saponin IV分子式：784.97分子量： C4H68O4：84687-43-4

α-甲丙英文名稱：Alpha methyl acrylic acid分子式：86.09分子量： C4H6O2：79-4-4

過氧月桂酰（LPO）分子式：398.62英文名稱：Peroxide (LPO)：05-74-8分子量： C24H46O4

甲綠英文名稱：Methyl green分子式：653.24分子量： C27H35BrCl3N3Zn：904440

-Boc-4-分子式：20.27英文名稱：-Boc-4- cyano piperidine：949-52-2分子量： CH8N2O2

3-氟-4-甲吡分子式：.2英文名稱：3- -4- methyl pyridine：399-88-2分子量： C6H6FN

氯銅鉀分子式：39.59英文名稱：Potassium chloride：3877-24-2分子量： CuCl2·2KCl·2H2O

4-(2,4-二氯芐氧)-,3-二甲-5-吡唑甲磺酸鹽分子式：439.3英文名稱：4- (2,4- two) -,3- two methyl -5-：580-68-0分子量： C9H6Cl2N2O4S

3,6-二氯咔唑分子式：236.英文名稱：3,6- two chlorine carbazole：5599-7-3分子量： C2H7Cl2N

培養步驟：
人肺大靜脈內皮細胞培養對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。