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技術(shù)文章

白介素2 ELISA試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)化操作流程與注意事項(xiàng)全解析
點(diǎn)擊次數(shù):305 更新時(shí)間:2025-04-26
  白介素2 ELISA試劑盒在檢測白介素2的含量方面具有重要應(yīng)用,以下為你詳細(xì)介紹其標(biāo)準(zhǔn)化操作流程與注意事項(xiàng)。
 
  ??一、操作流程??
 
  1.??實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備??
 
  準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)所需的各種器材、試劑等,確保試劑盒在有效期內(nèi),且試劑儲存條件符合要求。
 
  將試劑盒平衡至室溫,一般需30分鐘。
 
  2.??樣本處理??
 
  對待檢測樣本進(jìn)行適當(dāng)處理,如血清樣本需充分離心去除雜質(zhì),細(xì)胞培養(yǎng)上清需經(jīng)過過濾除菌等。
 
  3.??加樣??
 
  在微孔板的相應(yīng)孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣本,每孔200μL,注意避免交叉污染。輕輕振蕩反應(yīng)板,使樣品充分混勻。
 
  ??4.孵育??
 
  將反應(yīng)板置37℃溫箱中孵育1小時(shí),讓樣本與包被的抗體充分結(jié)合。
 
  5.??洗滌??
 
  每孔加入350μL洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌3次,較后在濾紙上拍干。
 
  6.??加酶標(biāo)物??
 
  每孔加入酶標(biāo)物100μL,37℃溫箱孵育30分鐘。
 
  7.??顯色與檢測??
 
  加入顯色劑A、B液各50μL,37℃避光顯色15分鐘。接著加入50μL終止液,15分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm波長處測定OD值。

 


 
  ??二、注意事項(xiàng)??
 
  1.操作過程要嚴(yán)格遵循無菌原則,防止樣本污染。
 
  2.加樣時(shí)務(wù)必準(zhǔn)確,注意每一孔的添加量和對應(yīng)關(guān)系。
 
  3.洗滌環(huán)節(jié)要完整,確保去除多余的底物和雜質(zhì),但又不能過度洗滌致使抗體丟失。
 
  4.不同試劑盒的孵育時(shí)間和溫度可能會略有差異,需嚴(yán)格按照試劑盒說明書執(zhí)行。
 
  5.檢測過程中應(yīng)盡量避免強(qiáng)光直射,以防止OD值異常。
 
  只要嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化流程操作并注意相關(guān)事項(xiàng),就能運(yùn)用白介素2 ELISA試劑盒獲得準(zhǔn)確可靠的檢測結(jié)果。

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